Desarrollo y evaluación de un protocolo serológico de fluorescencia polarizada en el estudio de anticuerpos contra Brucella spp en humanos / Development and evaluation of a serological protocol of fluorescence polarization for the preliminary study of Brucella spp antibodies in humans

A objeto de mostrar el desarrollo y alcance de un método de análisis serológico basado en la técnica de fluorescencia polarizada (FPA) a partir de una gota de sangre obtenida mediante punción capilar, se realizó la determinación de anticuerpos antibrucelosis de un conjunto de 321 personas de alto riesgo laboral. Los resultados se compararon con la data proveniente del análisis de sueros sanguíneos mediante FPA e inmunoanálisis enzimático competitivo (ELISA-c). El número de concordantes fue 318 (99,06%), los 3 discordantes (0,93%) resultaron negativos con fluorescencia polarizada en suero (FPAs) y ELISA-c, pero positivos con FPA capilar (FPAc). Los resultados comparativos de FPAc fueron: sensibilidad: 100%; especificidad: 99,05%; valor predictivo positivo: 66,67%; valor predictivo negativo: 100,0%; proporción de falsos positivos: 0,95%; proporción de falsos negativos: 0%; exactitud: 98,0%; razón de probabilidades: 203,00. La J de Youden para ambos métodos de FPA fue de 0,667. La determinación se consideró confiable y la concordancia de ambos procedimientos de FPA y ELISA-c resultó sin diferencias estadísticas (P>0,05%), lo que permite recomendar ampliamente la implementación del estudio de la brucelosis humana con sangre proveniente de punción capilar como método preliminar.

In order to show the development and scope of a serological analysis method based on fluorescence polarization assay (FPA) from a drop of blood obtained by the capillary technique, a Brucella antibody assay was performed on a group of 321 high-risk workers. The results were compared with data from the analysis of blood serum by FPA and a competitive enzyme immunoassay (ELISA-c). The number of concordance was 318 (99.06%), and discordant 3 (0.93%), which were negative in serum by fluorescence polarization (FPAs) and ELISA-c, but positive with capillary FPA (FPAc). The comparative results FPAc were: sensitivity 100%; specificity: 99.05%; positive predictive value 66.67%; negative predictive value 100.0%; false positive rate: 0.95%; false negative rate: 0%; accuracy: 98.0%; odds ratio: 203.00. The youden J for both FPA methods was 0.667. The identification was considered reliable and the correlation of both procedures, FPA and ELISA-c, was no statistically different (P> 0.05%), which allows to highly recommend the study implementation of human brucellosis with capillary blood as a preliminary method.

Infección por Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis en un rebaño criollo limonero / Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis infection in a criollo limonero herd

El objetivo de este estudio consistió en definir, analizar y evaluar la situación de un rebaño Criollo Limonero elite en relación a la paratuberculosis bovina. La investigación se llevó a cabo utilizando las variables epidemiológicas y el análisis de muestras (leche y suero) mediante inmunoensayo enzimático (ELISA) comercial. Posteriormente, se tomaron como base estos resultados y utilizando otras herramientas diagnósticas como la exploración clínica, tinción directa, cultivos, identificación mediante ensayo de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) y estudio histomorfológico, todas ellas dirigidas a confirmar el estado de la infección. Los resultados permiten aseverar la existencia de infección por Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAsP) en tasas de positividad variable. La técnica de ELISA mostró alta capacidad en la identificación de animales subclinicamente afectados, lo que demuestra su potencial como prueba primaria de diagnóstico en el establecimiento de futuros programas de control. La técnica de amplificación por PCR reveló la presencia de genoma de subespecies de Mycobacterium avium, lo cual apoya fuertemente la presunción de infección en estos animales por MAsP, pese a la imposibilidad de lograr claras evidencias clínicas, clinicopatológicas, microbiológicas e histopatológicas que permitieran corroborar este dictamen. La estrecha correlación entre los resultados de ELISA y PCR, ratifica no sólo la confirmación diagnóstica, sino también validan los datos obtenidos a través de la prueba serológica.

The purpose of this research was to define, analyze and evaluate the situation of an elite Criollo Limonero herd related to bovine paratuberculosis. The investigation was carried out using the epidemiological variables and samples analysis (milk and serum) through a commercial enzyme immunoassay (ELISA). The results of the above test were taken as a foundation to use other diagnostic tools, such as clinical examination, direct staining, bacterial culture, identification through polymerase chain reaction (PCR) and histopathologic studies, to find out the status of the disease. The results allowed asserting the infection by the presence of Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAsP) in positive variable rates. The ELISA technique showed high capacity in identification of the sub clinical affected animal, which proved its potential as a diagnostic primary test in the establishment of future control programs. The PCR amplification revealed Mycobacterium avium subspecie genome presence, which lead to predict these animals infection by MAsP, in spice of the impossibility to accomplish clear clinical, clinic pathologic, microbiologic and histopathologic evidences that allowed corroborating the diagnosis. The narrow relation between ELISA and PCR results ratified not only the diagnostic confirmation, but also they validated the data collected through the serological test.

Residuos de enrofloxacina en tejido hepático y muscular de pollos beneficiados en el municipio san francisco del estado zulia, venezuela / Remainders of Enrofloxacina in Muscular and Hepatic Tissues of Slaughtered Chickens Benefitted in the San Francisco Municipality, Zulia State, Venezuela

El presente estudio fue conducido para determinar la presencia de residuos de enrofloxacina en los tejidos (músculo e hígado) de pollos beneficiados en cuatro plantas ubicadas en el municipio San Francisco del estado Zulia, Venezuela. Se tomó un pollo directamente de los expendios ubicados en cada planta durante cinco días consecutivos, dando un total de veinte pollos. El análisis de las muestras se realizó a través de cromatografía líquida de alta resolución (HPLC). La presencia de enrofloxacina se encontró por encima de los Límites Máximos de Residuos sugeridos por la FDA, Codex Alimentario y EMEA, al alcanzar los siguientes resultados: 3,5 mg/kg en muslo, 3,81 mg/kg en pechuga y 3,62 mg/kg en hígado, lo cual abre una duda razonable en relación a la salud de los consumidores de pollo. Adicionalmente, se discute sobre la posibilidad de considerar contaminantes o no, a tales niveles de enrofloxacina.

The present study was lead to determine the presence of remainders of enrofloxacine in tissues (muscle and liver) of slaughtered chickens in four plants located in the San Francisco municipality of the Zulia state, Venezuela. A chicken was taken directly from the retail store in each plant during five consecutive days, giving a total of twenty chickens. The analysis of the samples was made through liquid chromatography of high resolution (HPLC). The enrofloxacine presence was over the Limits Maximum suggested of Remainders by FDA, Nourishing Codex and EMEA, when reaching the following results: 3.50 mg/kg in breast, 3.81 mg/kg in leg and 3.62 mg/kg in liver, which let a reasonable doubt in relation to the health of the chicken consumers. Additionally, it is discussed on the possibility of considering polluting agents or not such levels of enrofloxacine.